Descripción
Las bacterias decoloradas se resaltan posteriormente con un colorante de contraste rojo y se denominan gram negativas.
La capacidad de las bacterias gram positivas para retener el complejo colorante-yodo se atribuye al enlace que se forma entre dicho complejo y una molécula presente únicamente en bacterias gram positivas: el ribonucleolato de magnesio.
METODOLOGÍA
Llevar la sección a agua destilada.
Sumergir la sección en floxina e incubar a 56-58°C durante 15 minutos.
Recuperar la solución en el frasco filtrándola mediante papel de filtro.
Lavar con agua destilada.
Colocar 10 gotas de violeta sobre la sección y dejar actuar durante 3 minutos.
Escurrir el portaobjetos y, sin lavarlo, colocar 10 gotas de Lugol y dejar actuar durante 3 minutos.
Lavar con agua destilada y secar el portaobjetos primero con papel de filtro y después al aire durante 10 minutos.
Sumergir las secciones en el ácido durante 1 minuto en dos pasos; recuperar la solución en el frasco filtrándola mediante papel de filtro.
Deshidratar y montar.
RESULTADOS
Bacterias gram positivas → Azul
Bacterias gram negativas → Rojo
Núcleos → Rojo
SOLUCIONES
Solución de floxina B — 30 ml
Solución de violeta de cristal — 30 ml
Lugol — 30 ml
Diferenciador ácido — 30 ml
Diferenciador ácido — 30 ml
